Equipamiento
El CMA BÍO-BÍO cuenta con diferentes estaciones de trabajo básico y de tecnología avanzada, que prestan servicios en forma independiente, con un amplio espectro de uso para las áreas de desarrollo científico y tecnológico.
Microscopio FT-IR Spotlight 400 & Spectrum Frontier, Perkin Elmer
El equipo FTIR, modelo Spectrum Frontier acoplado a un sistema de Microscopio modelo Spotlight 400, es un equipo de última generación en el estudio de imágenes espectrales, ideal en las áreas de materiales, farmacéutica, academia, forense, biomédica, y biomateriales. Este equipo trabaja en el Infrarrojo Rango Medio (MID) y Rango Cercano (NIR) lo que permite el estudio de una amplia gama de compuestos. El equipo Spotlight 400 trabaja en los modos de operación de Transmisión, Reflección y modo ATR; tiene un sistema dual de operación y de detección DuetTM permitiendo aumentar significativamente la obtención de información de los datos de espectros y de imágenes. Presenta una resolución variable de píxel hasta 1.56 nm con ATR, logrando imágenes excepcionales de las muestras.
  • Rango de trabajo total disponible 14,700-350 cm-1(depende de cada modo)
  • Detectores tipo NB MCT (NIR Band Mercurio Cadmio Telurio) y MB MCT (MID Band Mercurio Cadmio Telurio)
  • Posibilidad de obtener imágenes con tamaño de muestra (pixel) 1.56 & 6.25 µm (modo ATR) y 6.25, 25, 50 µm (modo Imagen). El modo de escaneo Point Mode permite ajustar el tamaño y orientación de área escaneada según las necesidades.
  • Resolución espectral controlable entre 2 y 64 cm-1.
  • El software que controla el equipo y manipular los resultados es Spectrum (versión 10.03.06.0100) & SpectrumIMAGE (versión R1.7.1.0401).
Microscopio Confocal LSM700, Zeiss
Microscopio de escaneo confocal que cuenta con un estativo invertido semi-motorizado, con una cómoda pantalla táctil que facilita el control de los filtros y objetivos así como el uso del sistema de enfoque y ajustes para la observación. El cabezal de escaneo confocal cuenta con 2 detectores de alta sensibilidad y 3 líneas de láser que permiten obtener imágenes en distintos planos focales de hasta 3 marcadores fluorescentes. El software de adquisición Zen 2011 de Zeiss facilita un trabajo rápido e intuitivo permitiendo la visualización de las imágenes tanto en 3D como en vista de cortes ortogonales así como algunos análisis y afinamiento de cada uno de los canales configurados. Este equipo es ideal para la observación rápida y análisis general de imágenes con marcadores como GFP, Alexa Fluor 488 – Cy3, Alexa Fluor 555 – Topro 3, Cy5 – Alexa Fluor 633 entre muchos otros.

CARACTERÍSTICAS DEL EQUIPO.

Estativo de microscopio invertido semi-motorizado, modelo Axio Observer Z1.

Set de filtros para epifluorescencia
UV: Ex. 365 - Beam Splitter FT 395 – Em. BP 445/50 (Ejemplo: DAPI)
Verde: Ex. BP 450 – 490 - Beam Splitter FT 510 – Em. BP 515 – 565 (Ejemplo: FITC – Cy2)
Rojo: Ex. BP 546/12 - Beam Splitter FT 560 – Em. BP 575 – 640 (Ejemplo: Cy3 - Rodamina).

Líneas de láser

De 488 nm, 555 nm y 639 nm.

Sistema de Objetivos

EC-Plan-Neofluar 10x, NA: 0.3, WD. 5.2 mm; 20x; EC Plan-Neofluar NA: 0.5, WD 2.0; 40x oil DIC, NA: 1.3, WD. 0.21 mm; Plan-Apochromat 63x oil DIC, NA: 1.4, WD. 0.19 mm.
Microscopio Confocal Espectral y Dos Fotones LSM780 NLO Zeiss
El sistema de microscopia multifotón permite generar imágenes profundas, tridimensionales de tejido y estructuras vivas de hasta aproximadamente 0.5 mm. de grosor con resolución subcelular. De gran utilidad en el estudio de estructuras subcelulares tales como espinas y procesos axonales en neuronas que demandan una imagen con una alta razón señal y ruido en una gran área o volumen debido a la amplia distribución de los procesos neuronales.

Características del equipo.

Estativo de microscopio invertido totalmente motorizado, modelo Axio Observer Z1.

Líneas de láser

Líneas de láser de 405 nm, 458 nm, 488 nm., 514 nm., 561 nm. y 633 nm. Además, el equipo también cuenta con un láser pulsado multifotónico ajustable desde 680 a 1080 nm. en pasos de 1 nm. y utiliza fotones de poca energía (infrarrojo) en pulsos extremadamente cortos lo cual disminuye el daño causado por el haz de luz de los láseres convencionales en las muestras biológicas.

Sistema de Objetivos.

Objetivo EC-Plan-Neofluar 10x, NA: 0.3, WD. 5.2mm; 20x; EC Plan-Neofluar NA: 0.5, WD 2.0; 40x oil DIC, NA: 1.3, WD. 0.21 mm; Plan-Apochromat 63x oil DIC, NA: 1.4, WD. 0.19 mm.

Sistema de detección.

Posee un detector policromático equipado con 32 fotomultiplicadores GaASP más 2 fotomultiplicadores PMP FL que permite separación espectral y la detección simultánea de hasta 10 marcadores. Posee además un detector de luz transmitida T-PMT

Set de filtros para epifluorescencia.

UV: Ex. 365 - Beam Splitter FT 395 – Em. BP 445/50 (Ejemplo: DAPI)
Verde: Ex. BP 450 – 490 - Beam Splitter FT 510 – Em. BP 515 – 565 (Ejemplo: FITC – Cy2)
Rojo: Ex. BP 546/12 - Beam Splitter FT 560 – Em. BP 575 – 640 (Ejemplo: Cy3 - Rodamina)
Microscopio Láser de súper-resolución ELYRA S.1 (SIM-SR), Zeiss
El poder de resolución de un microscopio óptico se encuentra limitado a 200 nm lateralmente (eje xy) y a 700 nm en dirección axial (plano z), debido a las restricciones físicas impuestas por la difracción de la luz. Utilizando la tecnología de luz estructurada y análisis matemático/computacional, podemos sobrepasar estos límites, doblando el poder de resolución tanto lateral como axialmente (100 y 350 nm). Esta es la tecnología que posee el microscopio de súper resolución por luz estructurada (SIM-SR), que cuenta con dos láser de 488 y 561 nm, logrando súper-resolución a dos colores, ideal para el análisis y estudio de finas estructuras celulares como la distribución de fibras de estrés y microfilamentos, estudios de colocalización de marcadores sinápticos, análisis de distribución de proteínas transportadoras en la membrana plasmática, etc.

  • Estativo de microscopio invertido totalmente motorizado, modelo Axio Observer.Z1 HR.
  • Líneas de laser 488 y 561 nm.
  • Set de filtros (dicroico) 77 HE, GFP/mRFP/Alexa 633,
    • EX TBP 483-564+642
    • BS TFT EX 506+582+659
    • EM TBP 526+601+688
  • Objetivos EC Plan-Neofluar 10x/0.30 (AN) M27, WD=5.2 mm
  • Objetivo Plan-Apochromat 63x/1.40 (AN) DIC M27, WD=0.19 mm, inmersión en aceite.
Sistema de microscopía para micro-disección láser LMD 7000, Leica
Esta técnica permite cortar y aislar microscópicamente un trozo de muestra homogénea desde cualquier tipo de tejido heterogéneo. La disección de la muestra se realiza a través de un potente láser ultravioleta de 349 nm controlado por un preciso sistema óptico libre de movimientos mecánicos. Algunas de sus características son:

  • Microscopio upright completamente motorizado: Para las técnicas de Campo claro (BF), Contraste de Fase (PH), DIC, Fluorescencia (FLUO) y Luz Polarizada (POL).
  • Cámara digital Leica DFC310FX (1.4 megapixeles) captura imágenes de epifluorescencia y también en campo claro.
  • Objetivos 5x,10x, 20x, 40x y 63x y un objetivo seco de 150x para cromosomas. 
  • Láser de potencia ajustable lo que permite cortar tanto muestras blandas como muestras duras.
  • Las muestras histológicas pueden estar cortadas, fijadas y/o  teñidas y deben estar montadas sobre un tipo especial de soportes como membrane slides o frame slides.
Citómetro de Flujo Cell Sorter BD FACSAria III
La citometría de flujo nos permite el análisis y caracterización simultánea de partículas y/o células y sus subpoblaciones.

El equipo BDFACSAria III cell sorting permite además la separación simultánea de hasta 4 poblaciones, con un rango de tamaño que va de 0.2 a 50 µm.

El sistema óptico esta compuesto por 2 láser, 488 nm y 633 nm, teniendo la capacidad de detectar 8 colores, 10 parámetros (incluidos FSC y SSC). La configuración del equipo es 5-3 (5 colores que son excitados por el láser azul y 3 por el rojo) con los siguientes filtros: Láser azul (488nm):780/60 BP, 695/40 BP, 616/23 BP, 585/42, 530/30. Láser rojo (633nm):780/60BP, 730/45 BP, 660/20 BP.

Posee nozzle integrados de 70, 85 y 100 µm, que nos permite el análisis y separación de la mayoría de las aplicaciones.

Posee controles de calidad CST y Accudrop que nos aseguran que los resultados son confiables.
Centro de Microscopía Avanzada,CMA Bío-Bío. Universidad de Concepción.
Barrio Universitario s/n. Edificio Ennio Vivaldi 2do. piso. Concepción, Chile.
Fonos: (56) 41-2204531, (56) 41-2203479,(56) 41-2661356 - Fax (56) 41-2245975.
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